ELISA实验原理简单,步骤小,过程短,抽样箱操作相对简单,实验白是易于处理的,但即使实验人员快速,取得可靠的实验结果并不那么容易。
为了更好地协助实验,以下是有关ELISA测试箱和样品的常见问题列表:
试剂盒
问1你的ELISA测试箱能检测到哪些物种?
A1
目前,我们测试的种类主要是人类、老鼠和老鼠;少数指标涉及猴子、兔、猪和鸡等特殊种类。
如箱名具有特定方向(例如人),则代表特定物种;如不指定物种,则代表箱名适用于目前公司产品所涵盖的物种(例如人、老鼠、老鼠、猴子、兔等);若要检测其他特殊物种的适用性,请联络技术支援,以确认。
问296TELISA测试箱能检测多少样品?需要穿孔吗?
A2
为了确保实验结果的准确性,我们建议标准和样品进行穿孔,但不要强迫ELISA实验必须穿孔/3 perforated,客户可以根据自己的要求设置穿孔实验。 详情见下表:
Q3如果需要测试更多的样品,可以减少孔数吗?
A3
为了确保结果的准确性,不建议减少标记中的孔数。请确保至少能检测到六种不同的标准产品浓度(包括空白孔)。
Q4ELISA测试箱应该多次使用,但如果有更多的样品,只能一次校正?
A4
尽管ELISA实验的操作步骤相同,但各实验的影响不同,因此每个实验必须重新绘制标准曲线,以获得更准确可靠的测试结果。
如果需要重复实验,最高浓度标准可以分离和储存至-20°C,以避免重复冻结,并在半个月内有效使用。
样本
问1 血浆样品收集应采用哪种真空容器?
A1
血清:无抗凝剂的血管提取/有抗凝剂的血管提取
(通常是红色、黄色、橙色管帽)
血浆:含抗凝剂的血管收集
(通常为血管用绿色、紫色管盖)
如果在一周内收集和测试样品,可储存2-8 °C;如果不能及时测试样品,则应立即包装并在-20°C(1个月测试)或-80°C(3个月测试)冻结,以避免重复冻结。
在测试前,冻结的样品应慢慢融化,在冻结过程中产生的沉积物从心脏中除去。
问2收集时如何尽量避免出血?
A2
在外体,机械力振荡、低温冻结等可能导致出血。 为了避免出血对测试结果的影响,应注意:
(一)从静脉取血时,再抽血压力不应太大;
(二)一次性血量不应过小;
(三)收集的全部血液不适于强烈振动;
(四) centrifugal转速不应过高;
(五)收集的全血应尽快处理,如血清/血浆,全血不能冻结、融化;
(六)对血液收集需要麻醉,应使用无出血效果的麻醉。
Q3在收集组织/细胞样品时,应如何处理“可逆冻结”的过程?
A3
组织样本:研磨后,在80°C放置1小时/0.5小时的液态氮,然后在30°C的浴盆中轻微振动,使其快速融化,可重复1-2次;
细胞样本: 按照上述步骤, 2-3 次冻结. 如果它是膜蛋白,超声处理可以适当地进行,但需要控制超声处理的温度和频率。
建议先在样品中加入蛋白酶抑制剂,一般建议使用PMSF。
Q4我如何判断我的样品是否需要稀释或其他治疗?
A4
试验箱的测试范围不等于样品的浓度范围,建议在实验前根据相关文献估计样品浓度,并通过实验确定样品的实际浓度状况。
如果样品类型是常规的,你可以咨询ELISA技术支持,获得样品推荐的稀释倍数器,并安排实验前测试;
如果样品中浓度过高或过低,请适当稀释或浓缩样品;
如果样品的浓度远远低于测试箱的最低限度,则建议选择具有较高敏感度的测试箱。